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新產(chǎn)品發(fā)布 - STEMdiff 胃類器官試劑盒

時間:2021-09-30   瀏覽次數(shù):1945次


原創(chuàng):STEMCELL


很高興宣布推出從 hPSC 生成胃類器官的 STEMdiff? 胃類器官試劑盒。該培養(yǎng)系統(tǒng)由STEMdiff? 胃類器官分化試劑盒和STEMdiff? 胃類器官擴增試劑盒組成。其中STEMdiff? 胃類器官分化試劑盒用于將 hPSC 分化為胃類器官,STEMdiff? 胃類器官擴增試劑盒用于維持和擴增 hPSC 衍生的胃類器官。

 

產(chǎn)品描述

hPSC 衍生的胃類器官可用于研究胃發(fā)育、炎癥、再生、微生物相互作用或疾病建模。 使用 STEMdiff? 胃類器官分化試劑盒,可以高效且可重復(fù)地從hPSC 誘導(dǎo)和擴增胃類器官,以形成與發(fā)育中的胃具有生理相關(guān)性的便捷模型系統(tǒng)。

該試劑盒操作簡單,包含四階段操作步驟,參考了 McCracken et al. (Nature 2014)  Bartfeld et al. (Gastroenterology 2015發(fā)表的文獻,能夠直接從 hPSC 誘導(dǎo)并分化為胃類器官,并支持胃類器官的長期擴增和冷凍保存。用該試劑盒培養(yǎng)的胃類器官具有與發(fā)育中的胃上皮和相關(guān)間充質(zhì)一致的細胞組成,為胃研究以及藥物研發(fā)和化合物篩選提供了生理相關(guān)的模型系統(tǒng)。 該試劑盒優(yōu)化用于mTeSR?1(#85850)或 mTeSR? Plus(#100-0276)中培養(yǎng)的hPSC細胞。

 

 STEMdiff? 胃類器官分化試劑盒


STEMdiff? 胃類器官分化試劑盒

貨號 #100-0475

1 Kit

STEMdiff? Definitive Endoderm Basal Medium

05111

100 mL

STEMdiff? Definitive Endoderm Supplement CJ (100x)

05113

1.1 mL

STEMdiff? Gastrointestinal Supplement PK

05141

0.64 mL

STEMdiff? Posterior Foregut Supplement

100-0477

0.64 mL

STEMdiff? Gastric Organoid Medium

100-0478

100 mL

STEMdiff? Gastric Organoid Expansion Supplement

100-0479

1.1 mL

 

STEMdiff? 胃類器官擴增試劑盒

 

STEMdiff? 胃類器官擴增試劑盒

貨號 #100-0490

1 Kit

STEMdiff? Gastric Organoid Medium

100-0478

100 mL

STEMdiff? Gastric Organoid Expansion Supplement

100-0479

1.1 mL

STEMdiff? 胃類器官分化試劑盒的示意圖和分化過程中形態(tài)變化。

 hPSCs 以低密度(4,000 個細胞團塊/孔)的形式接種在康寧® Matrigel® 包被的 24 孔板上的 mTeSR?1 中,過夜培養(yǎng)。每天更換 mTeSR?1 培養(yǎng)基維持 2-D 單層培養(yǎng)物,直到細胞聚合度達到接近85 - 90%。

(A) 在第 0 天,使用 STEMdiff? Definitive Endoderm (DE) Medium(第 1 階段)替換 mTeSR?1 培養(yǎng)基開始分化過程,每天更換培養(yǎng)基。 

(B) 在第 3 天,去除 STEMdiff? Definitive Endoderm (DE) Medium并替換為 STEMdiff? Gastric Posterior Foregut (PF) Medium(第 2 階段)。在第 5 天,將retinoic acid (RA,視黃酸)添加到 PF 培養(yǎng)基中。 

(C) 在分化的第 7 天,從上清液中收集漂浮的后前腸球體并嵌入 Corning® Matrigel®。在第 7 天和第 10 天之間,在 STEMdiff? Gastric Organoid Medium + RA 中培養(yǎng)嵌入的 PF 球體(第 3 階段)。在第 10 天和第 26 天之間,球體在 STEMdiff? Gastric Organoid Medium中成熟為被間充質(zhì)包圍的胃類器官。

(D) 在第 20 - 26 天,在 STEMdiff? Gastric Organoid Medium中傳代的胃類器官已進行完全分化,直到觀察到胃標志物的表達(~第 34 天)。

(E)根據(jù)需求,可使用 STEMdiff? Gastric Organoid Expansion Medium 擴增胃類器官用于下游應(yīng)用或用CS10冷凍保存以備將來實驗。


四階段操作流程


應(yīng)用方向

1.基礎(chǔ)研究

2.胃的發(fā)育和功能

3.一般胃特異性細胞生物學(xué)

4.疾病建模

5.幽門螺桿菌感染

6.消化性潰瘍病

7.胃炎

8.幽門狹窄

9.轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)

10.精準醫(yī)療

11.胃毒性藥物篩選



產(chǎn)品優(yōu)勢

? 成分:無血清培養(yǎng)基可最大程度地減少變異性。

操作簡便:將 hPSC 分化為胃類器官只需簡單的四階段操作步驟。

生理相關(guān)性:產(chǎn)生模擬正在發(fā)育的胃和相關(guān)間充質(zhì)的人胃類器官。

速度快:分化后的胃類器官可實現(xiàn)快速擴增及凍存。

 


相關(guān)產(chǎn)品推薦

胃類器官培養(yǎng)過程所需試劑和耗材: 

產(chǎn)品名稱

貨號

mTeSR?1 OR mTeSR? Plus

85850 OR 100-0276

Corning® Matrigel® hESC-Qualified Matrix

Corning 354277

Corning® Matrigel® Growth Factor Reduced (GFR) Basement membrane Matrix, Phenol Red-Free (≥ 8 mg/mL protein)

Corning 356231

Gentle Cell Dissociation Reagent

07174

24-well tissue culture-treated flat-bottom plate

38017 or 38021

Anti-Adherence Rinsing Solution

07010

Retinoic acid(視黃酸,培養(yǎng)的第2-3階段需要額外添加)

72262

DMEM/F-12 with 15 mM HPEPES

36254

Microcentrifuge tubes, 1.7 mL

38089

Cell scraper/lifter

38065 or 38067

D-PBS (Without Ca++ and Mg++)

37550

Conical tubes, 15 mL and 50 mL

38009 and 38010

CryoStor® CS10(用于胃類器官凍存)

07930

 


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