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時間:2021-09-30 瀏覽次數(shù):1945次
原創(chuàng):STEMCELL
很高興宣布推出從 hPSC 生成胃類器官的 STEMdiff? 胃類器官試劑盒。該培養(yǎng)系統(tǒng)由STEMdiff? 胃類器官分化試劑盒和STEMdiff? 胃類器官擴增試劑盒組成。其中STEMdiff? 胃類器官分化試劑盒用于將 hPSC 分化為胃類器官,STEMdiff? 胃類器官擴增試劑盒用于維持和擴增 hPSC 衍生的胃類器官。
產(chǎn)品描述
hPSC 衍生的胃類器官可用于研究胃發(fā)育、炎癥、再生、微生物相互作用或疾病建模。 使用 STEMdiff? 胃類器官分化試劑盒,可以高效且可重復(fù)地從hPSC 誘導(dǎo)和擴增胃類器官,以形成與發(fā)育中的胃具有生理相關(guān)性的便捷模型系統(tǒng)。
該試劑盒操作簡單,包含四階段操作步驟,參考了 McCracken et al. (Nature 2014) 和 Bartfeld et al. (Gastroenterology 2015)發(fā)表的文獻,能夠直接從 hPSC 誘導(dǎo)并分化為胃類器官,并支持胃類器官的長期擴增和冷凍保存。用該試劑盒培養(yǎng)的胃類器官具有與發(fā)育中的胃上皮和相關(guān)間充質(zhì)一致的細胞組成,為胃研究以及藥物研發(fā)和化合物篩選提供了生理相關(guān)的模型系統(tǒng)。 該試劑盒優(yōu)化用于mTeSR?1(#85850)或 mTeSR? Plus(#100-0276)中培養(yǎng)的hPSC細胞。
STEMdiff? 胃類器官分化試劑盒
STEMdiff? 胃類器官分化試劑盒 |
貨號 #100-0475 |
1 Kit |
STEMdiff? Definitive Endoderm Basal Medium |
05111 |
100 mL |
STEMdiff? Definitive Endoderm Supplement CJ (100x) |
05113 |
1.1 mL |
STEMdiff? Gastrointestinal Supplement PK |
05141 |
0.64 mL |
STEMdiff? Posterior Foregut Supplement |
100-0477 |
0.64 mL |
STEMdiff? Gastric Organoid Medium |
100-0478 |
100 mL |
STEMdiff? Gastric Organoid Expansion Supplement |
100-0479 |
1.1 mL |
STEMdiff? 胃類器官擴增試劑盒
STEMdiff? 胃類器官擴增試劑盒 |
貨號 #100-0490 |
1 Kit |
STEMdiff? Gastric Organoid Medium |
100-0478 |
100 mL |
STEMdiff? Gastric Organoid Expansion Supplement |
100-0479 |
1.1 mL |
STEMdiff? 胃類器官分化試劑盒的示意圖和分化過程中形態(tài)變化。
hPSCs 以低密度(4,000 個細胞團塊/孔)的形式接種在康寧® Matrigel® 包被的 24 孔板上的 mTeSR?1 中,過夜培養(yǎng)。每天更換 mTeSR?1 培養(yǎng)基維持 2-D 單層培養(yǎng)物,直到細胞聚合度達到接近85 - 90%。
(A) 在第 0 天,使用 STEMdiff? Definitive Endoderm (DE) Medium(第 1 階段)替換 mTeSR?1 培養(yǎng)基開始分化過程,每天更換培養(yǎng)基。
(B) 在第 3 天,去除 STEMdiff? Definitive Endoderm (DE) Medium并替換為 STEMdiff? Gastric Posterior Foregut (PF) Medium(第 2 階段)。在第 5 天,將retinoic acid (RA,視黃酸)添加到 PF 培養(yǎng)基中。
(C) 在分化的第 7 天,從上清液中收集漂浮的后前腸球體并嵌入 Corning® Matrigel®。在第 7 天和第 10 天之間,在 STEMdiff? Gastric Organoid Medium + RA 中培養(yǎng)嵌入的 PF 球體(第 3 階段)。在第 10 天和第 26 天之間,球體在 STEMdiff? Gastric Organoid Medium中成熟為被間充質(zhì)包圍的胃類器官。
(D) 在第 20 - 26 天,在 STEMdiff? Gastric Organoid Medium中傳代的胃類器官已進行完全分化,直到觀察到胃標志物的表達(~第 34 天)。
(E)根據(jù)需求,可使用 STEMdiff? Gastric Organoid Expansion Medium 擴增胃類器官用于下游應(yīng)用或用CS10冷凍保存以備將來實驗。
四階段操作流程
應(yīng)用方向
1.基礎(chǔ)研究
2.胃的發(fā)育和功能
3.一般胃特異性細胞生物學(xué)
4.疾病建模
5.幽門螺桿菌感染
6.消化性潰瘍病
7.胃炎
8.幽門狹窄
9.轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)
10.精準醫(yī)療
11.胃毒性藥物篩選
產(chǎn)品優(yōu)勢
? 成分:無血清培養(yǎng)基可最大程度地減少變異性。
? 操作簡便:將 hPSC 分化為胃類器官只需簡單的四階段操作步驟。
? 生理相關(guān)性:產(chǎn)生模擬正在發(fā)育的胃和相關(guān)間充質(zhì)的人胃類器官。
? 速度快:分化后的胃類器官可實現(xiàn)快速擴增及凍存。
相關(guān)產(chǎn)品推薦
胃類器官培養(yǎng)過程所需試劑和耗材:
產(chǎn)品名稱 |
貨號 |
mTeSR?1 OR mTeSR? Plus |
85850 OR 100-0276 |
Corning® Matrigel® hESC-Qualified Matrix |
Corning 354277 |
Corning® Matrigel® Growth Factor Reduced (GFR) Basement membrane Matrix, Phenol Red-Free (≥ 8 mg/mL protein) |
Corning 356231 |
Gentle Cell Dissociation Reagent |
07174 |
24-well tissue culture-treated flat-bottom plate |
38017 or 38021 |
Anti-Adherence Rinsing Solution |
07010 |
Retinoic acid(視黃酸,培養(yǎng)的第2-3階段需要額外添加) |
72262 |
DMEM/F-12 with 15 mM HPEPES |
36254 |
Microcentrifuge tubes, 1.7 mL |
38089 |
Cell scraper/lifter |
38065 or 38067 |
D-PBS (Without Ca++ and Mg++) |
37550 |
Conical tubes, 15 mL and 50 mL |
38009 and 38010 |
CryoStor® CS10(用于胃類器官凍存) |
07930 |
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